防腐挑戰檢測主要用于測定防腐劑發揮有效抗菌效果的zui低濃度，以此確定化妝品配方里防腐劑的合理添加用量。不論是化妝品新配方開發、在售產品驗證，還是新型防腐劑的應用研究，均需開展防腐效能試驗，為化妝品注冊備案、配方研發及產品質量管控提供重要的科學依據。

化妝品防腐挑戰檢測方法

1、試驗菌株選擇

常規測試菌株包含細菌：金黃se葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸桿菌;真菌：白色念珠菌、巴西曲霉。企業也可以根據產品定位、原料特性，增加其他污染風險菌株，例如洋蔥伯克霍爾德菌等化妝品高頻污染菌，進一步提升評估嚴謹性，菌株優先選用 CMCC 標準菌株，也可使用 ATCC 菌株，需要留存菌株溯源資料。

2、樣品接種操作

在無菌實驗室環境下，取足量代表性成品樣品，菌懸液加入體積不得超過樣品總體積 1%，避免大量稀釋改變化妝品配方本身理化性質。細菌接種目標濃度 10?~10? CFU/g (mL)，真菌接種目標濃度 10?~10? CFU/g (mL)，充分混勻，保證微生物均勻分散在樣品基質當中，試驗樣品放置 25℃±1℃恒溫避光培養，模擬日常儲存環境。

3、中和劑驗證

中和劑驗證是防腐挑戰試驗的先決條件，直接決定試驗數據是否有效?；瘖y品樣品中含有防腐劑，取樣稀釋檢測時，殘留的防腐劑會繼續抑制平板上殘存微生物生長，造成計數結果偏低，誤判防腐效果。必須提前完成中和方法確認，選擇合適中和劑，充分中和樣品內抑菌成分，確認中和劑本身無毒性、不促進微生物異常增殖，中和體系有效，后續檢測數據才具備參考價值。

4、定時取樣計數

分別在接種后第 2 天、7 天、14 天、28 天時間節點取樣，經過中和處理之后，采用平板計數法測定每個菌種的存活菌落數，計算每一個時間點相對于初始接種濃度的對數降低值，完整記錄全部時間節點數據，不能只看終點 28 天結果，中期反彈是防腐體系失效非常典型的表現。

5、結果判定邏輯

標準分為 A、B 兩套判定準則。 準則 A 代表防腐體系充分有效，不需要額外包裝、使用限制，細菌 7 天 log 下降≥3.后續無微生物回升;真菌 14 天實現明顯對數下降，28 天無增長。

中科檢測-化妝品檢測機構

中科檢測具備化妝品備案檢驗資質，擁有標準化微生物實驗室，開展化妝品原料及化妝品防腐挑戰檢測，出具專業檢測報告，幫助化妝品企業高效完成安全評估，規避產品上市之后微生物安全風險，助力化妝品行業高質量合規發展。